Mis on bakterioloogiline uuring? Millise skeemi järgi seda tehakse? Mida antud juhul ohutuse all mõeldakse? Millised on bakterioloogiliste uuringute eesmärgid ja etapid?
Üldine teave
Bakterioloogiline uuring on teaduslik protsess, mille käigus tuvastatakse bakterid ja uuritakse nende omadusi, et panna mikrobioloogiline diagnoos. Siin on suur tähtsus tekkiva mikroorganismi tüübi või liigi määramisel (see tähendab puhaskultuuri). Sellega kaasneb organismide biokeemiliste ja füsioloogiliste omaduste ning toksiinide moodustumise kalduvuse uurimine. Nendel eesmärkidel kasutatakse sadestamis- ja aglutinatsioonireaktsioone. Seda kasutatakse ka laboriloomade nakatamiseks, millele järgneb patoloogiliste muutuste avastamine.
Testimaterjaliga töötamine
Bakterioloogilise uuringu algoritm näeb ette erijuhiste ranget järgimist. Seega tuleb uuritav materjal koguda steriilsetesse nõudesse aseptilistes tingimustes. Samuti on vaja hoolitsedaet tagada võimalikult kiire toimetamine laborisse. Soovitav on proove hoida külmas. Bakterioloogiliste uuringute tehnika näeb ette palju võimalikke olukordi. Seega tingivad objekti tüüp, mikroorganismi omadused ja haiguse iseloom sageli individuaalse tööjuhendi väljatöötamise. Töös kasutatakse suurt hulka erinevaid meetodeid. Üks levinumaid on bakterioskoopia. Aga kui baktereid ei fikseerita, kasutatakse purustatud või rippuvat tilka. Tuleb märkida, et kahte viimast võimalust iseloomustab kõrgem nakkavuse tase.
Bakterioskoopia
Sel juhul kasutatakse lööke. Nende loomiseks tuleb slaidi pinnale jaotada tilk uuritavat vedelikku. Zates peaks selle kuivatama. Seda tehakse sageli, liigutades ravimit läbi gaasipõletist saadud leegi. Kuigi alternatiivina võib kasutada fikseerivaid ühendeid. Et näidata, et selle preparaadiga on tehtud ettevalmistavad toimingud, on see värvitud. Sellise manipuleerimise eesmärk on täpsus, mis on mikroskoopilise ja bakterioloogilise uuringu läbiviimisel väga oluline. Lõppude lõpuks, kui kasutate ravimit muul eesmärgil, saate putru, millega on väga raske tõhus alt töötada.
Miks on bakterioskoopia nii populaarne
Mitte selle meetodi kättesaadavuse tõttu. Kui tehakse värske preparaadi bakterioloogiline uuring, siis patogeeni määramiseksvõib kasutada mikrokeemilisi reaktsioone või mikroorganismi erinevate struktuuriosade selektiivset värvimist. Milline on parem? Täpsema tulemuse saab värvilise preparaadiga töötades. Sel juhul kantakse katsematerjal eelnev alt ettevalmistatud slaidile. Ja kindlasti õhuke (ja võimalusel ühtlane) kiht. Pärast seda peate ootama, kuni ravim õhu käes kuivab. Seejärel fikseeritakse mikroorganismid, kasutades üht tavapärastest meetoditest. Pärast seda värvitakse jahutatud preparaat diferentsiaal- või lihtvärviga. Selleks võib kasutada kuivi ja looduslikke preparaate. Pärast seda jääb üle suunata ultraviolett- või lühikesed sinised kiired organismide kuhjumiskohta, mis paneb kogu mikroobi või selle teatud kehaosad hõõguma.
Bakterioskoopia praktiline rakendamine
Seda kasutatakse mitmete nakkushaiguste diagnoosimiseks. Tuntuimad neist on tuberkuloos, gonorröa ja korduv palavik. Lisaks kasutavad nad uurimistööd, et uurida elundi või toote kogu mikrofloora kompleksi. Kuid kriitikud osutavad sageli selle meetodi suhtelisele ebausaldusväärsusele ja ebatäpsusele.
Põllukultuurid ja bakterikultuuride subkultuurid
Viige need läbi Pasteuri pipetiga. Bakterioloogilist ja tsütoloogilist uuringut on sageli raske teostada ilma inokuleerimise ja subkultuurita tööprotsessi ajal. Pasteuri pipetiga töötamisel selle otsmurda pintsettidega ära. Seejärel kantakse tööriist ise läbi põleti leegi ja lastakse seejärel jahtuda. Muide, külvamiseks võib kasutada nii vedelat kui ka tahket toitainekeskkonda. Valikut mõjutab see, milliseid bakterioloogiliste uuringute eesmärke taotletakse. Samal ajal tuleb järgida töö algoritmi ja ettevaatusabinõusid. Seega tuleb vedela toitainekeskkonnaga töötades jälgida, et see välja ei valguks ega märjaks korgi ja katseklaaside servi. Kui uuring viiakse läbi tahke materjaliga, kasutatakse kultuuri sisenemiseks sageli spetsiaalset nõela. Kui külvatakse ja külvatakse ümber, tuleks need teha gaasipõleti leegi lähedal. Katse puhtuse huvides ei tohiks katseklaas kauaks avatuks jääda. Mis puutub kultuuriga tööriista: peaksite veenduma, et see ei puuduta midagi. Samuti näeb bakterioloogilise uuringu tehnika ette katseklaasi servade põletamise enne selle sulgemist. Valmistoode tuleb allkirjastada kohe pärast valmistamist, et vältida edaspidist segadust.
Külvi tõhusus
Arvatakse, et see meetod võimaldab saada bakterioloogilise diagnoosimise käigus täpsemaid ja usaldusväärsemaid andmeid kui varem vaadeldud bakterioskoopia. Sel juhul on toimingute algoritm järgmine:
- Esialgu määritakse puhaskultuur toitekeskkonna pinnale, mis valatakse Petri tassi.
- Esmane külv tuleks teha liigile soodsates tingimustesmikroorganismid.
- Pärast päeva või paari liiguvad kõik sobivad kolooniad optimaalse keskkonna olemasolul sinna, kus nad saavad maksimaalselt areneda. See vabastab nad seega võõrast mikrofloorast.
Lõpptulemus on homogeensete bakterite kultuur, mida saab tuvastada.
Puhtkultuurid
Aga kuidas neid tehakse? Selleks kasutatakse bioloogilisi ja mehaanilisi meetodeid. Esimesel juhul mängivad suurt rolli toitainekeskkond, kus on olemas konkreetse kultuuri arenguks soodsad tingimused. Seda lähenemisviisi saab kasutada ka siis, kui teatud tüüpi bakterite suhtes vastuvõtlikud laboriloomad nakatuvad. Mehaanilised meetodid põhinevad steriilse instrumendi kasutamisel, millega kultuur asetatakse toitesöötmesse, mis asub esimeses, teises ja kolmandas Petri tassis. Siis tuleb oodata, kuni üksikud kolooniad kasvavad ja nende seast paistab juba puhas kultuur. Baktereid saab kasvatada ka spetsiaalsetes termostaatides, kus temperatuur hoitakse teatud tasemel (tavaliselt umbes 37 kraadi). Sel juhul jätkub protsess umbes ühe päeva. Kuid olenev alt mikroorganismide tüübist võib kehtestada ka muid termineid. Samuti on oluline hapniku vajaliku kontsentratsiooni olemasolu. Selleks kasutage erinevaid õhutusviise. Siiani oleme rääkinud olukorrast tervikuna ja üldiselt, kuid nüüd keskendume sellele, milline on bakterioloogiliste uuringute skeem.
Harjutamine
Patogeensete mikroorganismide tuvastamiseks patsiendi või potentsiaalse kandja kehas kasutatakse sageli meetodite komplekti. Kasutatavad materjalid ja meetodid sõltuvad analüüsi eesmärkidest, samuti keskkonna tingimustest, kus tööd tehakse. Praktikas avastatakse baktereid enamasti inimeselt või loom alt võetud verekultuuride kaudu. Kui lokaalsed kahjustused on hästi määratletud, saab patogeene otsida probleemsetest piirkondadest. See on tüüpiline selliste vaevuste puhul nagu düsenteeria, gonorröa, difteeria ja mitmed muud sarnased. Eriti rasketel juhtudel jagatakse see protsess bakterioloogilise uuringu eraldi etappideks (mis on tüüpiline kõhutüüfuse korral). Igaüks neist kasutab oma meetodeid, mille eesmärk on leida nakkuse põhjus. Vaatame kõhutüüfuse olukorda lähem alt. Haiguse esimesel nädalal on kõige usaldusväärsem viis haiguse diagnoosimiseks verekülv. Teisel juhul peetakse selliseks seroloogilist uuringut. Kolmandal nädalal uuritakse väljaheidet. Viimaseks meetodiks loetakse taastujate kontrollimist.
Mikroorganismide tuvastamine
See algab värvimisprotsessist. Seejärel vaadatakse, kuidas bakter suudab lagundada süsivesikuid, aminohappeid jne. Lisaks saab seda protsessi täiendada muude omaduste uurimisega, mis igal üksikul mikroorganismide perekonnal või liigil on. Näitena tuleks tuua erinevate loomade erütrotsüütide lahustamise võimalused, toime vereplasma koagulatsioonile ja trombide lahustumisele.fibriin ja nii edasi. Kõik see on mikromaailma üksikute esindajate erisused. Samuti saab lõplikuks tuvastamiseks kasutada seroloogilist identifitseerimist (aga see puudutab tavaliselt soolestiku perekonda kuuluvaid patogeenseid baktereid).
Järeldus
Tuleb märkida, et mitmeid mikroorganisme ei saa artiklis kirjeldatud meetoditega tuvastada. Sel juhul kasutatakse laialdaselt laboriloomade nakatamist. Arvutamisel lähtutakse asjaolust, et ilmneb iseloomulik toksilisus või patogeensus, mida kunstlikes tingimustes ei täheldata. Nakatumist saab kasutada ka patogeensete mikroobide kogunemise meetodina. Ja juba siis, kui võrrelda uuritud kultuuri bioloogiliste, morfoloogiliste, seroloogiliste ja biokeemiliste omaduste uurimise käigus leitud omadusi, võib öelda, et on teada, milliste mikroobidega on tegu. Identifitseerimine tähendab bakteri perekonna, liigi ja tüübi määramist. Kui uuritav mikroorganism erineb teatud omadustes oma tüüpilisest omadusest, tuleb see märkida. Paljud eksperdid usuvad, et sellistel juhtudel on kasulik uuesti tuvastada kõik kasutatud meetodid ja tehnikad. Mõnikord võib uurimistöö viia järgmisele tasemele, mis nõuab tõsisemat (ja kulukamat) lähenemist. Kui saadi negatiivsed tulemused, näitab see, et preparaatmikroorganismid puudusid või ei olnud elujõulised. Kuid uuringute täpsuse huvides, kui kahtlustatakse mitmeid batsillikandjaid (düsenteeria, difteeria, kõhutüüfus), näidatakse sellistel juhtudel korduvat kontrolli. See on vajalik selleks, et spetsialistidel oleks täpne ettekujutus, millega nad peavad tegelema.
