Mõelge artiklis, mis see on – PCR-diagnostika? Inimese papilloomiviirus (HPV) on tänapäeval väga levinud haigus, mis esineb kroonilises vormis ja on täis sagedasi ägenemisi. Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on kõige kaasaegsem meetod papilloomiviiruse diagnoosimiseks. Seda meetodit peetakse väga usaldusväärseks ja see aitab tuvastada mitte ainult selle viiruse olemasolu inimkehas, vaid ka selle kogust ja mitmekesisust. HPV PCR-analüüs on tundlik isegi viiruse mitteaktiivsete vormide suhtes, mille puhul ei esine väliseid ilminguid kondüloomide ja papilloomide kujul.
Millel meetod põhineb?
Põhineb patsiendi DNA uuringul, et tuvastada selles ahelas võõrkomponentide olemasolu. See koosneb neljast nukleotiidist, mis on paigutatud kindlasse järjestusse. Kui viirus satub kehasse, toimub selles ahelas järjekord, mis võimaldab hoolik alt jälgida ka kõige tähtsusetumate võõrosakeste aktiivsust. HPV PCR uurimistehnika viiakse läbi viirusosakeste abil, mis määrab rakkude jagunemise kiiruse.
Mis määratleb teadustöö?
See diagnostiline põhimõte võimaldab teil jälgida HPV aktiivsust mitte ainult passiivses olekus, vaid ka inkubatsiooniperioodil. PCR diagnostika määrab:
- HPV olemasolu organismis;
- patsienti nakatavad tüved;
- kvantitatiivne sisaldus kehas.
Papilloomiviirusega nakatus enamik inimesi, kuid tugev immuunkaitse pärsib selle ilminguid ega lase paljuneda. Seega ei saa HPV kvalitatiivset tuvastamist alati õigustada, kuna pole ratsionaalne, kui organismis on viirusosakesi, kuid nende mõju on nii minimaalne, et see ei kahjusta inimest kuidagi. Kvalitatiivne analüüs näitab positiivset tulemust ja see ajab inimese sageli segadusse.
Kvantitatiivne meetod
Seetõttu kasutatakse diagnoosimisel kõige sagedamini kvantitatiivset meetodit, mis võimaldab jälgida viirusetekitajate hulka organismis ja teha kindlaks, kui ohtlik on nende tegevus. Lisaks on oluline kindlaks teha HPV tüvede mitmekesisus. Need jagunevad onkogeensuse astme järgi: mõned neist võivad saada onkoloogiliste haiguste esinemise peamiseks teguriks, teised on aga täiesti ohutud ja võivad põhjustada vaid mõningaid kosmeetilisi probleeme.
Iga individuaalne olukord nõuab individuaalset lähenemist,seetõttu on enne selle laboriuuringu läbimist soovitatav konsulteerida kvalifitseeritud spetsialistiga, kes ütleb teile, kuidas ja milliste tüvede puhul oleks kõige parem testida, võttes arvesse patsiendi seisundit ja kliinilisi sümptomeid.
Juhtivuse näidustused
Kõige olulisem põhjus HPV suhtes PCR-testi tegemiseks on tüükade olemasolu kehal.
Selle viirusega nakatumine on võimalik ainult inimeselt. Pärast vereringesse tungimist hakkab patogeenne mikroorganism paljunema naha ülemistes kihtides, mis põhjustab iseloomulike ilmingute tekkimist - kondüloomide või papilloomide moodustumist. Kuna see haigus on üsna levinud ja esineb peaaegu 80% elanikkonnast, on sellesse nakatumise tõenäosus äärmiselt suur. Papilloomiviirused kanduvad edasi:
- kaitsmata vahekord;
- suudlemise ajal;
- em alt last sünnitades;
- majapidamises;
- tiheda kokkupuutega nahaga.
Peamised näidustused HPV tuvastamiseks vereanalüüsiks ja PCR-määrimiseks on selle haiguse nahasümptomid, mis näevad välja nagu rippuvad tüükad niiditaolise peenikese varre otsas. Isegi kui selliseid kondüloome nahal ei täheldata, võib viirus veres siiski esineda, kuid selle kulg on asümptomaatiline. Kui patsiendil on diagnoositud 18. ja 16. alatüübi papilloomiviiruse infektsioon, on soovitatav teda regulaarselt kontrollida eriarstide, näiteks günekoloogi ja uroloogi juures, teha diagnostilisi protseduure ja teha HPV-testid, sestAinult õigeaegse diagnoosimisega on võimalik teatud vähivormide teket ära hoida.
Tehnika tüübid
HPV PCR-diagnostika osana on välja töötatud neli peamist testimismeetodit, millest igaühel on teatud eripärad ja mis määratakse haige inimese seisundit arvesse võttes. Parima meetodi valimiseks on vaja ekspertide nõu. Niisiis, neli meetodit:
- Kvalitatiivne meetod, mida kasutatakse viiruse olemasolu ümberlükkamiseks või kinnitamiseks organismis. Selle peamiseks puuduseks on võimetus kindlaks teha HPV tüve tüüpi (ainult 14-21 tüüpi). Kõige sagedamini kasutatakse kvalitatiivset meetodit samaaegselt teiste papilloomiviiruse tuvastamise meetoditega. Tulemus teatatakse kahe hinnanguga: "ei leitud" või "tuvastatud". See tähendab, et see meetod kinnitab võõra DNA olemasolu või näitab selle puudumist.
- Genotüpiseerimine on meetod, mille abil saab määrata viiruse olemasolu inimkehas ja määrata selle mitmekesisuse. Seda meetodit kasutatakse juhtudel, kui on vaja kindlaks teha, kas viiruse DNA jääb pärast ravi alles või on täheldatud ägenemist uue infektsiooni tagajärjel. Genotüpiseerimine aitab hinnata ravi efektiivsust, määrates kindlaks HPV tüübi. Kui see on sama tüvi, millega patsienti raviti, siis ravi ebaõnnestus. Kui analüüs näitab teist tüüpi HPV esinemist, võib see viidatauuesti nakatumine.
- Kombineeritud meetod, mis on kõrgelt spetsialiseerunud diagnostikameetod, mis põhineb kvalitatiivsel ja 16 tüve tuvastamisel genotüpiseerimisel. Tulemust saab esitada 3 vastusega: "tuvastatud tüvi 16", "ei tuvastatud" ja "tuvastatud HPV tüüp 16 kaasa arvatud". Seda meetodit kasutatakse, kui kahtlustate teatud tüüpi papilloomiviiruse esinemist, mis võib naistel põhjustada emakakaelavähki.
- Kvantitatiivne PCR-meetod kõrge onkogeense riskiga HPV jaoks, mis võimaldab määrata viiruse taset veres ja jälgida selle arengut. Seda peetakse kõige informatiivsemaks, kuna see võimaldab teil määrata patoloogilise protsessi tõsiduse, mille põhjal valitakse õige ravi. Meetod põhineb viirusrakkude arvu määramisel uuritud 100 tuhande piires. Kui nende koguarv on üle 5, näitab see papilloomiviiruse suurt kontsentratsiooni kehas, mis suurendab vähirakkude tõenäosust. Kui kogus on väiksem kui 3, loetakse kontsentratsioon tühiseks.
Kuidas testi ette valmistada ja sooritada?
HPV biomaterjalina võib võtta verd, kuid meestel võetakse kõige sagedamini kusiti ja naistel emakakaela sekretsiooni.
Spetsiaalne ettevalmistus HPV PCR jaoks ei ole vajalik. Peamine tingimus on mitte urineerida paar tundi enne protseduuri. Lisaks on soovitav mitte olla seksuaalvahekorras 2-3 päeva enne uuringut ja mittejoo alkohoolseid jooke. Samal ajal ärge unustage intiimhügieeni protseduure.
Meestele
Mehed võtavad tampooni – peenisepead ja kusiti töödeldakse soolalahusega. Spetsialist kasutab spetsiaalset harja, mis torgatakse ureetrasse umbes 4 cm. Kerge pöörlemisega kogutakse bioloogiline materjal, asetatakse katseklaasi ja saadetakse laborisse uuringuteks. Samal ajal saate seda säilitada kuni 2 päeva alates kogumise hetkest.
Naised
Mädimine PCR-analüüsiks HPV tuvastamiseks naistel toimub järgmiselt: emakakaelale kantakse steriilne lahus, seejärel võetakse emakakaelakanalist pintsliga tampooniga tampoon. Seade sisestatakse ligikaudu 1 cm sügavusele, mille järel arst kraabib pöörlevate liigutustega kanali seinu. Bioloogiline materjal asetatakse spetsiaalsesse katseklaasi, kus see jääb umbes 15 sekundiks. Selles pühib spetsialist selle vastu seinu ja võtab seejärel välja. Järgmisena saadetakse katseklaasi sisu laboratoorseks testimiseks.
Materjali õige proovide võtmine uurimistööks on eduka diagnoosimise ja usaldusväärse tulemuse saamise võti. Kui samal ajal rikutakse steriilsust ja võõrad mikroorganismid tungivad katseklaasi, võib analüüsi käigus tuvastada viiruse, mida tegelikult patsiendi kehas ei ole. Viga võib tekkida ka uurimistööks võetud materjali väikese hulga tõttu.
Kust võtta HPV PCR-i, on paljud inimesed huvitatud. Teste saab teha igas meditsiiniskliinikus või laboris, näiteks rakenduses "Invitro" või "Hemotest".
Meetodi eelised
PCR on üks peamisi diagnostikameetodeid ja on hetkel arstide seas kõige populaarsem. See uuring viiakse läbi mitte ainult HPV tuvastamiseks, vaid võimaldab tuvastada ka teisi patoloogilisi mikroorganisme, mis võivad seksuaalse kontakti kaudu edasi kanduda. Selline analüüs aitab diagnoosida varjatud infektsioone, hepatiiti jne. HPV PCR-testil on teiste haiguste tuvastamise meetodite ees mitmeid eeliseid. Need eelised on järgmised:
- Kõrge spetsiifilisus. Analüüs aitab kogutud biomaterjali uurides suure tõenäosusega eraldada võõr-DNA jälgi.
- Suure jõudlus. PCR uuring on automatiseeritud protsess, mis aitab uuringut läbi viia vahetult analüüsi päeval. See kiirus võimaldab inimesel tulemuste pärast pikka aega mitte muretseda ja saada see mõne päevaga enda kätte.
- Kõrge tundlikkus. Testimine võimaldab uurida viiruste aktiivsust ka inkubatsiooniperioodil, mil nende kontsentratsioon on väga madal. See aitab vältida patoloogilise protsessi teket ja alustada õigeaegset ravi.
- Võimalus teha mitu analüüsi korraga. Ühe vereproovi põhjal saab teha diagnostika, et määrata korraga mitu haigust. Näiteks saate samaaegseltgonorröa ja klamüüdia tekitaja tuvastamiseks. Samal ajal ei saa see protseduur negatiivselt mõjutada tulemuse usaldusväärsust.
Uuringu puudused
Hoolimata selle analüüsi suurest populaarsusest ja informatiivsusest, on HPV PCR-diagnostikas mõned negatiivsed aspektid. Peamine neist on valepositiivsete tulemuste tõenäosus. See juhtub siis, kui ravi on juba läbi viidud, infektsioon on hävinud, kuid surnud viirusrakud jäävad keha kudedesse siiski alles. Rakkude uuendamine võtab veidi aega. Kui teete uuringu varem kui 2-3 kuud pärast ravi, võib PCR anda positiivse tulemuse. Tehnika ei märka erinevusi, kuna see on suunatud viiruse DNA otsimisele, mida võib leida isegi juba surnud rakkudest. See aitab kaasa valepositiivsetele tulemustele. Seda olukorda saab vältida, kui laborianalüüs tehakse raviarsti määratud aja jooksul.
Ärakiri
Mida näitab HPV PCR dekrüpteerimine?
Arst peaks analüüsi tulemusi tõlgendama. Kuid on oluline, et patsient oleks teadlik tulemuste lehe struktuurist. Kui analüüs näitab "DNA-d ei tuvastatud", siis papilloomiviirust veres ei ole. Kui Lg indikaator on 5 või rohkem, näitab see selle kõrget kontsentratsiooni veres, Lg 3-5 - märkimisväärne kogus, alla 3 - ebaoluline kogus.
Valenegatiivne analüüs
Samuti,võib esineda vale-negatiivne analüüs. See juhtub, kui:
- kogutud bioloogilist materjali ladustati või transporditi valesti;
- steriilseid tingimusi rikuti ja patsiendi verre sattus teisi mikroorganisme;
- reaktiivide sobimatuse tõttu.
Valenegatiivsete tulemuste võimaluse välistamiseks on vaja selle analüüsi jaoks valida kõrgelt kvalifitseeritud personaliga tunnustatud labor.
Uurisime üksikasjalikult, kuidas ja miks PCR-diagnostikat tehakse. Mis see on, on nüüd selge.